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卵白由些许氨基酸脱水缩合陈列组成，含有一个游离的氨基（N端）和一个游离的羧基（C端）。C端与N打量似，在卵白质分子结构分析中具有垂死的地位，是卵白质齐备一级结构的必须信息，对C端序列进行测定具有垂死的敬爱。

北京百泰派克生物科技有限公司基于CNAS/ISO9001双重质料认证体系，凭证肽图分析（质谱法）旨趣，设置了针关于不同类别生物成品的卵白C端序列分析奇迹，可竣事对卵白、抗体、疫苗、多肽、重组胶原卵白等生物成品C端序列的测定。

工夫旨趣

现在尚未开导出访佛于Edman降解的C端序列测定工夫，因此卵白C端序列竟然证奇迹仍然所以质谱平台为基础。凭证靶卵白表面序列信息选拔互补性好的两种卵白酶酶切卵白，产生两个长度不同可是合乎离子化的C端肽段，经质谱检测，互相考据，最终笃定卵白C端序列。

附常见卵白酶酶切条目及位点：

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实践仪器

• 纳升级高效液相色谱仪：Easy-nLC 1200；

• 组合型四极杆-Orbitrap质谱仪：Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer。

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案例暗示

张军在发言中说，过去几天，安理会成员就巴以局势保持密切沟通。俄罗斯提出了决议草案，体现了聚焦人道关切、保护平民的大方向，得到了许多国家，包括埃及、沙特、约旦、卡塔尔等阿拉伯国家的共提。中方支持安理会发挥负责任作用，支持一切旨在推动冲突降级、恢复和平的努力，欢迎任何有利于保护平民、缓解人道危机的倡议。基于这一立场，中方对付诸表决的决议草案投了赞成票。

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样品卵白过程恰当的卵白酶酶切之后变成长度大多在6-28aa的肽段，参加质谱分析后产生的总离子流谱图如下：

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样品总离子流谱图（TIC）

（横坐标为时候（min），纵坐标为相对信号强度）

通过一级质谱图不错赢得齐备肽段的分子量，mass=(m/z-1)*z

C端肽段一级质谱图

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（横坐标为检测到的m/z值，纵坐标为相对信号强度）

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二级质谱图赢得的是肽段的碎屑离子m/z值，齐备肽段在质谱中从肽键位置被打碎为碎屑离子，围聚肽段的N端的为b离子，围聚C端的为y离子（举例二级图中的肽段KTSTSPLVKSF, 二级碎裂之后，碎屑离子K和TSTSPLVKSF离别为b1和y10离子，碎屑离子KT和STSPLVKSF离别为b2和y9离子）。表面的碎屑离子m/z与本体二级图中的检测值匹配到的越多，竟然度越高。通过肽段二级碎裂片断信息笃定C端肽段序列

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肽段二级质谱图

（横坐标为检测到的m/z值，纵坐标为相对信号强度）

本体神志中会至少使用两种互补的卵白酶对靶卵白进行酶切，不错赢得两条长度不同的C端肽段，通过关于两条C端肽段序列的互相考据，最终笃定卵白的C端序列信息。

常见典型问题

问题1：卵白过程酶切后会在固定的位点断开，如何笃定C端的肽段便是卵白C端呢？

恢复：数据分析的时候会挑选N端为酶切位点而C端不是酶切位点的肽段，保证肽段是酶切形成的而不是立时的杂质肽段，同期保证肽段结尾与对比结尾是和谐的。

问题2：若是分析效果只须C结尾为酶切位点的肽段，如何跨越说明C端具体位置？

恢复：这种效果时时是两种情况变成的。第一种情况是卵白的C法例好是酶切位点，咱们不错通过不同酶切同期分析排斥这种情况。第二种是卵白C端离该酶切位点很近或很远，酶切之后剩余片断太短或太长，碎裂情况太差，无法被分析软件识别到宝马会体育，咱们不错设置一个梯度数据库，每个序列比上一下序列多一个氨基酸，欺诈梯度数据库再行比对分析。